Tinción
La tinción se utiliza en microscopía para que las células y los tejidos sean más fáciles de ver y comprender.
Es una forma de mejorar el contraste en la imagen microscópica. Las tinciones y los colorantes se utilizan a menudo en biología y medicina para resaltar las estructuras de los tejidos biológicos, a menudo con la ayuda de diferentes microscopios.
La tinción puede realizarse en tejidos vivos (in vivo) o en tejidos muertos (in vitro).
Microscopía de vanguardia: Los núcleos se tiñen de azul con DAPI, los microtúbulos se marcan en verde con un anticuerpo y los filamentos de actina se etiquetan en rojo con faloidina
Un montaje típico de un microscopio. Una muestra teñida en un portaobjetos de vidrio se monta en la platina de un microscopio
Preparación
El tejido muerto necesita ser "fijado" para que no se descomponga. El fijador mantiene la estructura tal como es. Tras la fijación, el tejido puede cortarse en rodajas finas y colocarse en una serie de portaobjetos de cristal. En ocasiones, es necesario disolver las membranas celulares para que las grandes moléculas de colorante puedan entrar en las células. Las normas se publican en la revista Biotechnic & Histochemistry.
Tinción
La forma más sencilla es sumergir el portaobjetos más el espécimen en una solución de colorante, luego enjuagarlo y examinarlo. Los tintes utilizados son tintes certificados, probados por la Comisión de Tintes Biológicos.
Bacterias de tinción
La tinción de Gram se utiliza para clasificar las bacterias. Se basa en la composición de su pared celular. La tinción de Gram utiliza cristal violeta para teñir las paredes celulares, yodo como mordiente y una contratinción que marca todas las bacterias.
Las bacterias Gram positivas se tiñen de azul oscuro o violeta. Su pared celular carece de la membrana secundaria y de la capa de lipopolisacáridos de las bacterias Gram negativas.
En la mayoría de las preparaciones con tinción de Gram, los organismos Gram negativos son de color rojo o rosa por la contratinción.
Tinción de tejidos
La tinción con hematoxilina y eosina se utiliza a menudo en histología para secciones finas de tejido. La hematoxilina tiñe de azul los núcleos celulares, mientras que la eosina tiñe de rosa o rojo el citoplasma, el tejido conectivo y otras sustancias extracelulares.
La eosina es fuertemente absorbida por los glóbulos rojos, coloreándolos de un rojo intenso. En una preparación de H&E bien hecha, los glóbulos rojos son casi anaranjados, y el colágeno y el citoplasma (especialmente el muscular) adquieren diferentes tonos de rosa. La hematoxilina tiñe de azul el núcleo de la célula y otras estructuras ácidas (como las partes ricas en ARN del citoplasma y la matriz del cartílago hialino). En cambio, la eosina tiñe de rosa el citoplasma y el colágeno.
Una tinción rápida y sencilla que se utiliza en los frotis de sangre y en las células de la mejilla humana es el azul de metileno, que tiñe los núcleos. Hay muchas otras tinciones especializadas, algunas fluorescentes bajo una luz especial.
Vista microscópica de una muestra histológica de tejido pulmonar humano teñida con hematoxilina y eosina
