La Interestatal 81 es una carretera interestatal de norte a sur en el este de Estados Unidos. Va desde Dandridge (Tennessee) en el sur hasta Wellesley Island (Nueva York) en el norte, con una distancia total de 1.375,81 km. Sigue los Montes Apalaches en casi toda su longitud.
La Interestatal 81 comienza en Tennessee en la Interestatal 40 en Dandridge. La ruta sigue los Montes Apalaches durante gran parte de su recorrido por Tennessee y Virginia, y da servicio a ciudades como las ciudades gemelas de Bristol (Tennessee) y Bristol (Virginia), Roanoke, Blacksburg, Lexington, Staunton, Harrisonburg y Winchester. En Harrisonburg, la I-81 atraviesa el campus de la Universidad James Madison. Sigue a su homóloga más antigua, la Ruta 11 de EE.UU., en toda su longitud en Virginia.
La carretera interestatal 81 se adentra brevemente en la franja oriental de Virginia Occidental y da servicio a la ciudad de Martinsburg. A continuación, atraviesa el estado de Maryland en uno de sus puntos más estrechos, pasando por la "Hub City" de Hagerstown, donde se cruza con muchas otras rutas.
La Interestatal 81 forma un importante corredor norte-sur a través del estado de Pensilvania, que da servicio a los distritos de Chambersburg y Carlisle, donde se une a la Pennsylvania Turnpike. Sin embargo, la I-81 no se intercambia directamente con ella (los automovilistas deben utilizar la US 11 para conectarse). Alrededor de la capital del estado, Harrisburg, la ruta forma la sección noreste de la Capital Beltway de Pensilvania. A continuación, la ruta se dirige al noreste hacia el valle de Wyoming, donde da servicio a las ciudades de Wilkes-Barre y Scranton, y luego se dirige al norte a través de la región de las Montañas Interminables hacia la frontera estatal. Aunque está señalizada como una autopista de norte a sur, es claramente de noreste a suroeste y ocasionalmente de este a oeste en todo el estado.
La Interestatal 81 entra en el estado de Nueva York cerca de Binghamton. Sigue la Ruta 11 de EE.UU. en dirección norte-sur, a través de gran parte del estado. Da servicio a las ciudades de Syracuse (donde se cruza con la autopista New York State Thruway), y Watertown. La ruta termina en la frontera canadiense, en el puente de las Mil Islas, donde cruza el río San Lorenzo, continuando como un corto conector, la autopista 137, que da servicio a la autopista de las Mil Islas y a la autopista 401.
La Coalición del Corredor de la Interestatal 81, una coalición de seis estados, se organizó para tratar los problemas de la Interestatal 81, como el tráfico de camiones y la contaminación del aire. Desde el 15 de octubre de 2008, esta comisión se ha reunido dos veces.


