Cromatografía en capa fina
La cromatografía en capa fina (o TLC) es un método por el que las mezclas se separan en sus componentes individuales.
La TLC se realiza en una placa de TLC. Estas placas están formadas por una capa de sílice y suelen estar respaldadas por una fina pieza de vidrio, aunque pueden utilizarse otros materiales como el plástico. El recubrimiento de sílice de la parte delantera de la placa de TLC se denomina fase estacionaria.
Realización de TLC
El proceso de ejecución de un experimento de TLC comienza con la colocación de una pequeña gota de analito líquido cerca del fondo de la placa de TLC. Esto se llama "manchar" la placa de TLC. Los tubos de vidrio muy finos se utilizan habitualmente como punteadores.
Una vez manchada la placa, se coloca en un recipiente de cristal con una pequeña cantidad de disolvente. Este disolvente se denomina fase móvil. Es importante que la altura del disolvente esté por debajo de la altura a la que se ha manchado el compuesto en la placa. A medida que el disolvente sube por la placa de TLC por acción capilar, el compuesto también se moverá. El compuesto se separará en sus componentes basándose en la atracción de cada componente por la fase estacionaria frente a la fase móvil. Los componentes que son atraídos por la fase móvil más que por la fase estacionaria se moverán más hacia arriba en la columna. Las fuerzas de atracción se basan en las diferencias de polaridad.
La placa de TLC debe retirarse antes de que el disolvente llegue a la parte superior de la placa. Los compuestos separados a veces serán coloreados, pero a menudo se requiere un trabajo adicional para el análisis. Muchos compuestos se iluminarán cuando la placa de TLC se coloque bajo una lámpara ultravioleta. Las placas de TLC también suelen sumergirse en tintes (como anisaldehído, permanganato de potasio o yodo) para forzar la aparición de un compuesto en la placa.
Aplicación
Los químicos orgánicos suelen utilizar la TLC para controlar el progreso de las reacciones. La presencia del material de partida y de los productos puede controlarse utilizando una sola placa de TLC.
Basándose en los resultados de un experimento de TLC, se puede separar un mayor volumen de mezcla mediante otra técnica (como la cromatografía en columna) utilizando un sistema de disolventes similar. O bien, se puede repetir un experimento de TLC utilizando un disolvente diferente. También pueden utilizarse mezclas de disolventes. El uso de diferentes disolventes afectará a la separación de los componentes individuales en la placa de TLC.
